Protein BCA Perangkat Pengujian

Kucing: PC0020

Ukuran: 500T (Pembaca Pelat Mikro) / 50T (Spektrofotometer)

Penyimpanan: Standar protein BSA disimpan pada suhu 4℃ untuk 3 bulan， atau pada -20℃ untuk 1 tahun, reagen lain disimpan pada suhu kamar selama 1 tahun

Komponen:

Deskripsi Produk:

• Prinsip Kit Uji Protein BCA:
  • Berdasarkan reduksi Cu^2+ menjadi Cu^+ oleh protein.
  • BCA membentuk kompleks ungu-biru dengan Cu^+ dalam kondisi basa.
  • Absorbansi terdeteksi pada 562nm.
  • Kuantifikasi protein dilakukan dengan membandingkan serapan dengan kurva standar.
• Kompatibilitas dengan deterjen:
  • Deterjen umum seperti SDS, Triton X-100, dan Tween tidak mempengaruhi hasil tes.
• Sensitivitas terhadap agen tertentu:
  • Dipengaruhi oleh agen chelating (EDTA, EGTA), agen pereduksi (DTT, merkaptoetanol), dan lipid.
• Pertimbangan latar belakang yang tinggi:
  • Dalam kasus latar belakang tinggi karena pengenceran sampel atau lisat, pertimbangkan untuk menggunakan Bradford Protein Assay Kit.

Protokol

A. Pelat mikroPembaca

1. Solusi kerja BCA

Mencairkan 1 volume Reagen Cu dengan 50 volume Reagen BCA (1:50). Jika terjadi curah hujan, itu akan hilang setelah pencampuran. Reagen kerja BCA dapat disimpan di RT selama 24 jam.

2. Solusi kerja standar BSA

Encerkan 10μl BSA (5mg/ml) dengan PBS sampai 100μl (0.5mg/ml). Menambahkan 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20μl solusi kerja standar BSA (0.5mg/ml) ke 96 piring sumur, tambahkan PBS hingga 20μl.

3. Encerkan sampel dengan benar. Lebih baik membuat beberapa gradien, seperti 2, 4, Dan 8 kali pengenceran. Tambahkan 20μl sampel ke 96-sumur

Catatan: Untuk menghindari kesalahan dalam langkah pengoperasian, buatlah titik sampel yang terletak di 1/2 sebisa mungkin berada di belakang garis standar, karena pipet memiliki kesalahan yang besar saat mengambil sampel dalam jumlah kecil, dan titik di depan garis standar mungkin tidak terlalu akurat.

4. Reaksi BCA

Tambahkan 200μl larutan kerja BCA ke 96 piring sumur, dan inkubasi pada suhu 37℃ selama 15-30 menit. Ukuran

serapan pada 562nm, dan menggambar kurva standar untuk menghitung kandungan protein sampel. Hindari penguapan air mempengaruhi hasil tes saat menggunakan inkubator.

B. Spektrofotometer

1. Solusi kerja BCA

Mencairkan 1 volume Reagen Cu dengan 50 volume Reagen BCA (1:50). Jika terjadi curah hujan, itu akan hilang setelah pencampuran. Reagen kerja BCA dapat disimpan di RT selama 24 jam.

2. Solusi kerja standar BSA

Encerkan 100μl BSA (5mg/ml) dengan PBS sampai 1 ml (0.5mg/ml).

3. Siapkan delapan (atau lebih) 5ml tabung sentrifugasi, dan menambahkan reagen sebagai berikut:

Catatan

Inkubasi di 37 ℃ selama 15-30 menit. Ukur serapan pada 562nm, dan menggambar kurva standar untuk menghitung kandungan protein sampel. Hindari penguapan air mempengaruhi hasil tes saat menggunakan inkubator.

1. Reagen Cu dan Pengenceran PBS dapat disimpan pada suhu 2-8℃ bila reagen tidak digunakan dalam waktu lama. Ketika reagen BCA mengkristal dan mengendap pada suhu rendah, dapat diinkubasi pada suhu 37℃ hingga larut sempurna tanpa mempengaruhi penggunaannya.
2. Jika sampel mengandung banyak zat pengganggu, silakan gunakan BCA Protein AssayKit (PC0020).
3. Demi keselamatan dan kesehatan Anda, harap kenakan sarung tangan dan masker kasa

Produk-produk terkait

Larutan standar protein PC0001 (5mg/ml BSA) Reagen BCA PC0021

PC0030 Kit Uji Protein Lowry PC0010 Kit Uji Protein Bradford R0010 Buffer RIPA(tinggi)

Kit Ekstraksi Protein Nuklir R0050 Kit Gel P1200 SDS-PAGE

Penyangga Lari Tris-Glisin T1070,5×

PR1600 Penanda Protein Tertahan(14.4kD-97.4kD) Penyangga pemuatan SDS-PAGE P1015,4×(dengan DTT) Penyangga Transfer WB D1060,10×

PE0010 ECL Substrat Western Blotting