Uvod
HiPure Plasmid EF Mini Kit Overview:
- Technology Integration:
- Combines HiPure technology with Magen’s innovative Endotoxin Removal Technology (ETR) to ensure high-quality plasmid DNA purification.
- Endotoxin Management:
- Features a specially formulated buffer designed to prevent endotoxins from binding to the HiPure matrix, significantly reducing endotoxin levels in the final DNA product.
- Application Suitability:
- Provides plasmid DNA ideal for eukaryotic transfection and in vitro experiments, especially where low endotoxin levels are critical.
- Impact of Endotoxin Contamination:
- Endotoxin contamination can drastically lower transfection efficiencies, particularly in endotoxin-sensitive cell lines.
- Clinical Relevance:
- In contexts such as gene therapy, controlling endotoxin levels is crucial due to the potential for serious adverse effects like fever, endotoxin shock syndrome, and negative impacts on in vitro transfection into immune cells.
pojedinosti
Tehnički podaci
| Značajke | Tehnički podaci |
| Glavne funkcije | Isolation up to 70µg endotoxin-free plasmid DNA from 10-15ml bacterial culture |
| Prijave | Transfekcija stanica, injekcija životinja, itd. |
| Metoda pročišćavanja | Mini spin stupac |
| Tehnologija pročišćavanja | Silika tehnologija |
| Procesna metoda | Priručnik (centrifugiranje ili vakuum) |
| Vrsta uzorka | Konvencionalni plazmid |
| Količina uzorka | High copy plasmid: 10ml culture medium
Low copy number plasmid : 10-15ml culture medium |
| Prinos | 10-70μg |
| Volumen eluacije | ≥75μl |
| Vrijeme po vožnji | ≤40 minuta |
| Nosivi volumen tekućine po stupcu | 800μl |
| Prinos vezivanja kolone | 70μg |
Načelo
HiPure Plasmid postupak temelji se na alkalnoj lizi bakterijskih stanica nakon čega slijedi adsorpcija DNA na siliciju u prisutnosti visoke soli. Jedinstvena membrana od silicijevog dioksida koja se koristi u kompletu u potpunosti zamjenjuje staklene ili silikatne kaše za minipreparacije plazmidne DNK. Postupak se sastoji od 3 osnovni koraci: Priprema i čišćenje bakterijskog lizata alkalnom metodom，zatim prenesite supernatant u kolonu za vezanje DNA. Nakon pranja proteina i drugih nečistoća, nukleinska kiselina je konačno eluirana s puferom s malo soli (10mm Tris, pH 9,0, 0.5mm EDTA).
Prednosti
- Visoka čistoća – pročišćeni plazmid može se izravno koristiti u sekvenciranju, enzimska probava i PCR, itd.
- Brzo – pročišćavanje stupca silika gela puno je brže od ionske izmjene
- Visok prinos – up to 70μg plasmid can be binded in one column
- Nizak sadržaj endotoksina – dobiveni plazmid može se izravno koristiti u transfekciji stanica i injekciji životinjama
Sadržaj kompleta
| Sadržaj | P115402 | P115403 |
| Vremena pročišćavanja | 50 Pripreme | 250 Pripreme |
| RNaza A | 5 mg | 20 mg |
| Buffer P1 | 30 ml | 140 ml |
| Buffer P2 | 30 ml | 140 ml |
| Buffer LEN3 | 15 ml | 70 ml |
| Buffer LN4 | 50 ml | 250 ml |
| Buffer LN5 | 30 ml | 140 ml |
| Buffer PW1 | 30 ml | 140 ml |
| Buffer PW2 | 12 ml | 50 ml |
| Elucijski pufer | 15 ml | 30 ml |
| HiPure DNA Mini Columns III | 50 | 250 |
| 2 ml cijevi za prikupljanje | 50 | 250 |
Skladištenje i stabilnost
Storage Instructions:
- General Storage:
- Kit components can be stored dry at room temperature (15–25°C).
- Stable for at least 18 mjeseci pod ovim uvjetima.
- Handling Precipitates:
- Ako se u puferima stvori bilo kakav talog, warm at 37°C to dissolve.
- Specific Storage for Buffer P1 with RNase A:
- After addition of RNase A, Međuspremnik P1 je stabilan za 6 mjeseca ako se čuva na 2–8°C.
Vodič za kupnju
| Ime | MAČKA BR | Količina uzorka | Vrsta stupca | Volumen eluacije | Prinos | Vrijeme po vožnji | Zahtjevi za centrifugu |
| HiPure Plasmid EF Mini Kit | P1154 | 10-15ml | 1.5ml stupca | ≥75μl | 10–70µg/15 ml | ≤40 minuta | mala centrifuga |
| HiPure plazmid EF 96 Kit | P1157 | 1-5ml | 96 bunar ploča | ≥75μl | 30µg/1 ml | ≤60 minuta | 96 well plate centrifuge |
| HiPure Plasmid EF Midi Kit | P1231 | 30-50ml | 15ml stupca | ≥0,4 ml | 10-500μg/50 ml | ≤60 minuta | 15ml centrifuga |
| HiPure Plasmid EF Maxi Kit | P1156 | 100-200ml | 50ml stupca | ≥0,8 ml | 100–1500µg/200ml | ≤60 minuta | 50ml centrifuga |
| HiPure Plasmid EF Mega Kit | P1116 | 500ml | 50ml stupca | ≥0,8 ml | 10mg/500 ml | ≤70 minuta | 50ml centrifuga |
Recenzije
Još nema recenzija.