Especificación: 4*50ml
| Reactivo | Composición |
|---|---|
| Reactivo (A) | Solución de tinción violeta cristal |
| Reactivo (B) | Solución ácida de diferenciación de etanol |
| Reactivo (C) | Solución de tinción de violeta cristal de oxalato de amonio |
| Reactivo (D) | Solución de yodo de Weigert |
Almacenamiento: Temperatura ambiente, evitar la luz
Descripción del Producto:
- Tinción de Gram:
- Invención:
- Inventado por el médico danés Christian Gram en 1884.
- Método:
- Método de tinción diferencial ampliamente utilizado en bacteriología..
- Forma de contratinción.
- Objetivo:
- Diferencia las bacterias en dos clases principales.:
- Gram positivos (GRAMO*)
- Gram-negativos (GRAMO)
- Diferencia las bacterias en dos clases principales.:
- Mecanismo:
- Tinción diferencial basada en diferencias en:
- Permeabilidad de la pared celular al etanol.
- Capacidad de resistir la decoloración.
- Espesor y estructura de la capa de peptidoglicano.
- Tinción diferencial basada en diferencias en:
- Proceso de tinción:
- Las células teñidas con cristal violeta y luego tratadas con yodo forman complejos insolubles.
- Decolorado por etanol.
- Puntos isoeléctricos:
- bacterias grampositivas: puntos isoeléctricos a pH 2.0-3.0
- bacterias gramnegativas: puntos isoeléctricos a pH 4.0-5.0
- Propiedades de enlace:
- Las bacterias grampositivas tienen más cargas negativas.
- Se une más estrechamente a tintes básicos como el violeta cristal..
- Formación de complejo:
- Después de agregar mordiente (yodo) en células bacterianas:
- Se forma un complejo violeta cristal-yodo-proteína insoluble en agua..
- Se une a las sales de magnesio del ácido ribonucleico dentro de las bacterias Gram positivas..
- Después de agregar mordiente (yodo) en células bacterianas:
- Resultado:
- Bacterias teñidas menos propensas a la decoloración..
- Invención:
Pasos operativos (solo por referencia):
- Fijación del tejido en 10% formalina, inclusión de deshidratación de rutina.
- Cortar secciones a un espesor de 4μm., y desparafinar rutinariamente al agua.
- Coloque las rodajas de tinción en una solución de tinción de violeta cristal para 5 minutos, luego desecha el tinte.
- Diferenciar en solución ácida de diferenciación de etanol para 2-5 segundos.
- Enjuague con agua corriente durante 3-5 segundos.
- Coloque las rodajas de tinción en una solución de tinción de violeta cristal de oxalato de amonio para 5 minutos, luego desecha el tinte. Utilice papel para absorber suavemente el exceso de líquido alrededor de las rodajas..
- Trate las rebanadas con solución de yodo de Weigert durante 1 minuto, luego deseche la solución de yodo. Absorba repetidamente la humedad dentro de las rodajas con papel de filtro..
- Diferenciar con la solución de orto-toluidina-xileno hasta que no se filtre color púrpura de las rodajas.. Lavar inmediatamente con xileno., y observar bajo un microscopio. Repita el lavado con xileno fresco varias veces para eliminar completamente la ortotoluidina.. Sellar con resina neutra.
Resultados de manchas:
- Bacterias Gram positivas y celulosa.: Azul-violeta
- bacterias gramnegativas: Rojo
- Núcleo celular: Rojo
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