Kit de mancha de flagela solarbio (silver stain)

Componentes del kit

Mix A1 and A2 with a ratio of 1:1 to form Tannic Acid Working Solution before use.

Introducción

• Role of Bacterial Flagellum:
  • The bacterial flagellum acts as the motor organ, facilitating movement in bacteria.
  • Notablemente, Helicobacter pylori utilizes its flagella to navigate through the mucus layer of gastric epithelial cells, from the highly acidic gastric cavity to the neutral environment of gastric epithelial cells.
• Flagella Staining Importance:
  • La tinción de flagelos permite la observación de la morfología de los flagelos, cantidad, y ubicación en bacterias.
  • These observations are crucial for bacterial identification and understanding their motility.
• Kit Description:
  • This kit utilizes the silver staining method for flagella staining.
  • It employs Ammonia Silver Staining Solution, known for its sensitivity and simplicity.
  • The use of this staining solution enhances the reliability of outcomes, providing accurate flagella visualization.

Materiales proporcionados por uno mismo

Alcohol lamp, slide, agua destilada, inoculation ring, microscope.

Protocolo (Solo por referencia)

1. Lugar 2 gotas de agua destilada en una limpieza, Diapositiva sin grasa.
2. Usando el anillo de inoculación, transferir agua destilada estéril al portaobjetos, luego recolecte bacterias de una colonia de placas de sangre, permitiéndoles nadar en el agua destilada dentro del anillo. Repita este proceso dos veces.
3. Gently shake the slide to disperse the bacteria. Evite moler o revolver para evitar el desapego de los flagelos.
4. Air-dry the slide at room temperature or in a 35°C incubator (avoid flame fixation).
5. Heat the Tannic Acid Working Solution in a clean container or test tube using an alcohol lamp. Cool slightly and use immediately.
6. Apply the heated Tannic Acid Working Solution to the slide and stain for 30-40 segundos. Slowly rinse with distilled water and air-dry by shaking.
7. Apply Ammonia Silver Staining Solution, heat gently, rinse with distilled water, and air-dry naturally.
8. Comience el examen microscópico desde el borde del frotis, gradualmente moviéndose hacia adentro. Los flagelos son más fáciles de observar dónde las bacterias están menos concentradas; pueden estar oscurecidos por la concentración bacteriana.

Resultado

• Thalli: Dark brown
• Flagellum: Brown

Nota

1. Asegúrese de que las diapositivas estén limpias y libres de contaminación del aceite.
2. Las muestras bacterianas para la tinción deben estar en la etapa de crecimiento activo, preferiblemente de subculturas sucesivas.
3. Handle with care during staining to prevent flagella detachment. Avoid high-temperature flame fixation.
4. Use the prepared Tannic Acid Working Solution within 10 minutes whenever possible.
5. Ammonia Silver Staining Solution is unstable; store it strictly avoiding light at 4°C and discard if serious turbidity occurs.
6. Por seguridad y salud, usar vestimenta de laboratorio y guantes desechables.