Proteína BCA Kit de ensayo

Gato: PC0020

Tamaño: 500t (Lector de microplacas) / 50t (espectrofotómetro)

Almacenamiento: El estándar de proteína BSA se almacena a 4 ℃ para 3 meses， o a -20 ℃ para 1 año, Otros reactivos se mantienen a temperatura ambiente para 1 año

Componentes:

Descripción del Producto:

• El principio del kit de ensayo de proteínas BCA:
  • Basado en la reducción de Cu^2+ a Cu^+ por proteínas.
  • BCA forma un complejo azul púrpura con Cu^+ en condiciones alcalinas.
  • La absorbancia se detecta a 562 nm.
  • La cuantificación de proteínas se realiza comparando la absorbancia con una curva estándar.
• Compatibilidad con los detergentes:
  • Detergentes comunes como Ficha de datos de seguridad (MSDS), Tritón X-100, y la tween no afectan los resultados de las pruebas.
• Sensibilidad a ciertos agentes:
  • Afectado por agentes quelantes (EDTA, Egta), Agentes reductores (TDT, mercaptoetanol), y lípidos.
• Altas consideraciones de fondo:
  • En casos de alto fondo debido a la dilución de la muestra o al lisado, Considere usar el kit de ensayo de proteínas Bradford.

Protocolo

A. MicroplataLector

1. Solución de trabajo de BCA

Diluido 1 Volumen de reactivo CU con 50 volúmenes de reactivo BCA (1:50). Si se produce la precipitación, desaparecerá después de mezclar. El reactivo de trabajo de BCA podría mantenerse en RT para 24 horas.

2. Solución de trabajo estándar de BSA

Diluir 10 μl de BSA (5mg/ml) con PBS hasta 100 μl (0.5mg/ml). Agregar 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20μL Solución de trabajo estándar BSA (0.5mg/ml) a 96 PLACOS BIEN, Agregue PBS hasta 20 μl.

3. Diluir la muestra correctamente. Es mejor hacer varios gradientes, como 2, 4, y 8 Dilución de veces. Agregue una muestra de 20 μl a 96 pocillos

Nota: Para evitar errores en los pasos de operación, hacer el punto de muestra ubicado en 1/2 detrás de la línea estándar tanto como sea posible, Como la pipeta tiene un gran error al tomar una pequeña cantidad de muestra, y el punto frente a la línea estándar puede no ser muy preciso.

4. Reacción BCA

Agregue 200 μl de solución de trabajo BCA a 96 PLACOS BIEN, e incubar a 37 ℃ durante 15-30 minutos. Medida

la absorbancia a 562 nm, y dibujar una curva estándar para calcular el contenido de proteína de muestra. Evite que la evaporación del agua afecte los resultados de la prueba cuando se usa una incubadora.

B. espectrofotómetro

1. Solución de trabajo de BCA

Diluido 1 Volumen de reactivo CU con 50 volúmenes de reactivo BCA (1:50). Si se produce la precipitación, desaparecerá después de mezclar. El reactivo de trabajo de BCA podría mantenerse en RT para 24 horas.

2. Solución de trabajo estándar de BSA

Diluir 100 μl de BSA (5mg/ml) con PBS hasta 1 ml (0.5mg/ml).

3. Preparar ocho (o más) 5tubos de centrífuga ml, y agregar reactivos de la siguiente manera:

Nota

Incubar en 37 ℃ por 15-30 minutos. Medir la absorbancia a 562 nm, y dibujar una curva estándar para calcular el contenido de proteína de muestra. Evite que la evaporación del agua afecte los resultados de la prueba cuando se usa una incubadora.

1. El reactivo CU y la dilución de PBS se pueden almacenar a 2-8 ℃ cuando el reactivo no se usa durante mucho tiempo. Cuando el reactivo BCA cristaliza y precipita a bajas temperaturas, Se puede incubar a 37 ℃ para disolverse por completo sin afectar su uso.
2. Si la muestra contiene muchas sustancias interferentes, Utilice BCA Protein AssayKit (PC0020).
3. Por tu seguridad y salud, Por favor use guantes y máscara de gasa

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