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Introducción
Características de la ARNasa A:
- Tipo de enzima:
- La ARNasa A es una endoribonucleasa que degrada específicamente el ARN monocatenario..
- Especificidad:
- Escinde específicamente el ARN en la citosina. (C) y uracilo (Ud.) residuos.
- Mecanismo de acción:
- La enzima escinde los enlaces fosfodiéster entre los 5′-ribosa de un nucleótido y el grupo fosfato unido a los 3′-ribosa de un nucleótido de pirimidina adyacente.
- Esta acción inicialmente forma un 2′,3′-fosfato cíclico, que posteriormente se hidroliza a 3′-nucleósido fosfato.
- Estructura:
- La ARNasa A es un polipéptido monocatenario que incluye 4 puentes disulfuro, contribuyendo a su estabilidad.
- Actividad óptima:
- La mayor actividad enzimática de la RNasa A se observa cuando actúa sobre el ARN monocatenario..
Aplicaciones de la ARNasa A:
Uso primario:
-
- La RNasa A se utiliza ampliamente para eliminar el ARN de preparaciones de ADN plásmido, asegurar que las muestras de ADN estén libres de contaminación por ARN.
Actividad en diferentes condiciones:
Influencia de la concentración de sal:
-
- A bajas concentraciones de sal. (0 a 100 mm NaCl), La ARNasa A puede escindir ARN tanto monocatenario como bicatenario, y la cadena de ARN en híbridos de ARN-ADN.
- En concentraciones de sal más altas (0.3 M NaCl o más), su actividad se vuelve específica del ARN monocatenario.
Detalles
Especificaciones
Características | Especificaciones |
Apariencia | Polvo liofilizado blanco o amarillo claro |
Peso molecular | 13.7 kda |
Pureza | ≥60% de ARNasa A (Ficha de datos de seguridad (MSDS)-PÁGINA) |
Actividad específica | >50 Unidades Kunitz/mg de proteína |
Condiciones de conservación | -20-8 °C. La RNasa es estable en condiciones de calentamiento y detergente y puede soportar el tratamiento a alta temperatura de 100 °C. |
Detección de residuos de ADNasa | No detectado. En 10μl (incluido 200 de plásmido) solución, Se añadió RNasa A a la concentración final de 50-100 μg/ml y se coloca a temperatura ambiente durante 30 minutos. Después de la electroforesis, la banda principal era obvia sin degradación. |
Solicitud | Eliminar ARN de preparaciones de ADN plasmídico |
Ventajas
- Alta actividad, >50 U/mg
- Rendimiento de alto costo
- Alta pureza, contaminación de proteínas de baja impureza
- Sin Dnase residual ni trazas de Dnase
Información sobre pedidos
Contenido | C12120 | C12121 |
ARNasa A, liofilizar, >50 U/mg de proteína | 1 gramo | 10 gramo |
Almacenamiento y estabilidad
Magen recomienda el almacenamiento en -20-8 °C. Cuando se almacena en 2-8 °C, el producto conserva la actividad durante al menos 2 años.
Reseñas
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