Introducción
The HiPure Mini system provides a fast, simple, y rentable ADN plásmido miniprep method for routine molecular biology laboratory applications. HiPure Plasmid Mini Kits use silica membrane technology to eliminate the cumbersome steps associated with loose resins or slurries. El ADN plasmídico purificado con Mini Kits está inmediatamente listo para su uso.. No se requiere extracción con fenol ni precipitación con etanol., y el ADN plasmídico de alta calidad se eluye en un pequeño volumen de tampón Tris o agua.
Detalles
Especificaciones
Características | Especificaciones |
Funciones principales | Isolation up to 70μg plasmid DNA from 5-15ml bacterial culture |
Aplicaciones | digestión enzimática, secuenciación, PCR, cloning, etc.. |
Método de purificación | Mini columna de giro |
Tecnología de purificación | tecnología de sílice |
método de proceso | Manual (centrifugación o vacío) |
Tipo de ejemplo | Plásmido convencional, plásmido de menos de 30 KB |
Cantidad de muestra | High copy plasmid: 1-5ml culture medium
Low copy plasmid : 5-10ml culture medium |
Producir | 20-80µg |
Volumen de elución | ≥75μl |
Tiempo por carrera | Complete 1-24 samples in 30 minutos |
Volumen de transporte de líquido por columna | 800l |
Rendimiento de unión de la columna | 70µg |
Principio
El procedimiento HiPure Plasmid se basa en la lisis alcalina de células bacterianas seguida de la adsorción de ADN en sílice en presencia de un alto contenido de sal.. La exclusiva membrana de sílice utilizada en el kit reemplaza completamente las suspensiones de vidrio o sílice para minipreparaciones de ADN plasmídico.. El procedimiento consiste en 3 Pasos básicos: Preparación y aclaración de un lisado bacteriano por método alcalino.,luego transfiera el sobrenadante a la columna para unir el ADN.. Después del lavado de proteínas y otras impurezas., El ácido nucleico finalmente se eluyó con un tampón bajo en sal. (10mm tris, pH9.0, 0.5mmEDTA).
Ventajas
- Alta pureza – El plásmido purificado se puede utilizar directamente en la secuenciación., digestión enzimática y PCR, etc..
- Rápido – solo se necesita 2 minutes to obtain supernatant by optimized solution (10 minutes for other brands)
- Alto rendimiento – Se pueden unir hasta 70 µg de plásmido en una columna.
Contenido del kit
Contenido | P100202 | P100203 |
Tiempos de purificación | 50 preparativos | 250 preparativos |
ARNasa A | 5 mg | 20 mg |
Búfer P1 | 30 ml | 140 ml |
Tampón P2 | 30 ml | 140 ml |
Buffer P3 | 40 ml | 200 ml |
Búfer PW1 | 30 ml | 140 ml |
Búfer PW2* | 12 ml | 50 ml |
Tampón de elución | 15 ml | 30 ml |
HiPure DNA Mini Columns III | 50 | 250 ml |
2 Tubos de recolección de ml | 50 | 250 ml |
Almacenamiento y estabilidad
Los componentes del kit se pueden almacenar secos a temperatura ambiente. (15-25°C) y son estables durante al menos 18 meses en estas condiciones. Si se forma algún precipitado en los tampones, calentar a 37 ℃ para disolver. Después de la adición de RNasa A,El búfer P1 es estable durante 6 meses cuando se almacena a 2-8°C.
Guía de compra
Nombre | NO GATO | Cantidad de muestra | Tipo de columna | Volumen de elución | Producir | Tiempo por carrera | Requisitos de centrífuga |
Mini kit de plásmido HiPure | P1001 | 1-5ml | 1.5columna de ml | 30-50µl | 5–35 µg/5 ml | ≤30 minutos | pequeña centrífuga |
Mini kit II de plásmido HiPure | P1002 | 5-15ml | 1.5columna de ml | 75-100µl | 20-80µg/15ml | ≤30 minutos | pequeña centrífuga |
HiPure Plásmido Plus 96 Equipo | P1006 | 1-1.5ml | 96 buen plato | 70-150µl | 1-15µg/1ml | ≤60 minutos | 96 centrífuga de placa de pocillos |
Kit Midi de plásmido HiPure Fastfilter | P1013 | 30-50ml | 15columna de ml | 0.3-0.8ml | 50–250 µg/50 ml | ≤60 minutos | 15centrífuga ml |
Kit maxi de plásmido HiPure Fastfilter | P1014 | 100-200ml | 50columna de ml | 0.5-1.5ml | 0.4–1mg/200ml | ≤60 minutos | 50centrífuga ml |
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