SolarBio Tetramethylrhodaminethylester(TMRE)

Tetramethylrhodamin -Ethylester (TMRE) ist ein fluoreszierender Farbstoff für die Visualisierung und Quantifizierung des mitochondrialen Membranpotentials in lebenden Zellen. Es gehört zur Familie von Rhodaminfarbstoffen und wird häufig in verschiedenen zellulären Assays eingesetzt, um die mitochondriale Gesundheit und Funktion zu untersuchen. TMRE sammelt sich in aktiv an, Polarisierte Mitochondrien, rote Fluoreszenz emittieren, Dies macht es zu einem wertvollen Instrument zur Beurteilung der potenziellen Veränderungen der Mitochondrienmembran.

Schlüsselmerkmale von TMRE:

1. Membranpotentialindikator:
   • TMRE ist empfindlich gegenüber Veränderungen des Mitochondrienmembranpotentials. Es akkumuliert aktiv, Polarisierte Mitochondrien, rote Fluoreszenz emittieren.
2. Zellpermeabilität:
   • TMRE ist zelldurchlässig und kann in Live-Zell-Bildgebungsexperimenten verwendet werden.

Wie man tmre benutzt:

1. Vorbereitung der TMRE -Stammlösung:
   • Bereiten Sie eine Stammlösung von TMRE vor, indem Sie sie in einem geeigneten Lösungsmittel auflösen (häufig DMSO) um die gewünschte Konzentration zu erreichen. Typische Arbeitskonzentrationen können von von 10 Zu 200 nm.
2. Zellvorbereitung:
   • Kulturzellen von Interesse an geeigneten Wachstumsmedien und Bedingungen. Stellen Sie sicher, dass die Zellen anhaftend sind oder leicht für die Bildgebung suspendiert werden können.
3. Laden von tmre:
   • Fügen Sie die TMRE -Stammlösung zum Zellkulturmedium oder zum Puffer bei der gewünschten Konzentration hinzu. Inkubieren Sie die Zellen für einen bestimmten Zeitraum mit TMRE, Typischerweise 15-30 Protokoll, Ermöglicht, dass der Farbstoff sich in Mitochondrien ansammeln.
4. Waschen (bei Bedarf):
   • Nach der Inkubationsperiode, Waschen Sie die Zellen mit einem Puffer, um überschüssiges TMRE aus dem Kulturmedium zu entfernen.
5. Mikroskopie und Bildgebung:
   • Führen Sie eine Live-Zell-Bildgebung mit einem Fluoreszenzmikroskop durch, das mit geeigneten Filtersätzen für rote Fluoreszenz ausgestattet ist. Erregen Sie TMRE um herum 550-580 NM und erkennen emittierte Fluoreszenz bei ungefähr 590-620 nm.
6. Mitochondriale Gesundheitsbewertung:
   • Analysieren Sie die Fluoreszenzintensität von TMRE in Mitochondrien. Eine höhere Fluoreszenz zeigt aktive und polarisierte Mitochondrien an, Während eine Abnahme der Depolarisation der Mitochondrienmembran hindeuten könnte.
7. Steuerelemente und Kalibrierung:
   • Geben Sie geeignete Kontrollen ein, wie Zellen, die mit mitochondrialen Entkoppelung oder depolarisierenden Mitteln behandelt werden, Um die Antworten zu kalibrieren und die Ergebnisse zu validieren.
8. Quantifizierung:
   • Verwenden Sie die Bildanalyse -Software, um die TMRE -Fluoreszenzintensität zu quantifizieren. Dies kann auf Einzelzellenebene oder für das gesamte Sichtfeld durchgeführt werden.
9. Dateninterpretation:
   • Interpretieren Sie die Ergebnisse im Kontext Ihrer experimentellen Ziele. Änderungen der TMRE -Fluoreszenz können Einblicke in die Mitochondrienfunktion liefern, Gesundheit, und Reaktionen auf verschiedene Reize.