- Herausforderungen bei der DNA -Extraktion aus Blutproben:
- Hohes infektiöses Risiko: Blutproben stellen den Betreibern und der Umwelt eine signifikante infektiöse Gefahr dar.
- Komplexe DNA -Quelle: Die Blut -DNA enthält verschiedene Arten wie Mitochondrien, genomisch, und zirkulierende DNA, was zu potenziellem Verlust während der Extraktion führt.
- Vorhandensein von Verunreinigungen: Blutproben enthalten Verunreinigungen und inhibitorische Faktoren, die die DNA -Extraktion und nachgeschaltete Anwendungen beeinträchtigen können.
- Bestehende Extraktionsmethoden:
- Phenol-Chloroform-Extraktion, ausgesalken, usw.
- Diese Methoden beinhalten typischerweise Schritte vor der Behandlung, um rote Blutkörperchen zu entfernen und weiße Blutkörperchen zu isolieren, Dies kann zu einem Verlust von Nukleinsäureinformationen führen.
- Produktvorteile:
- Schnelle und einfache Reinigung: Bietet eine schnelle und unkomplizierte Methode für die Gesamtzahl DNA-Reinigung.
- Eignung: Reinigt die gesamte DNA (genomisch, viral, mitochondrial) aus Vollblut, Gewebe, und kultivierte Zellen.
- Anwendung: Sorgt für zuverlässige DNA für PCR und Southern Blotting Assays.
Spezifikationen
Merkmale | Spezifikationen |
Hauptfunktionen | Isolierung von Gesamt -DNA aus 10 ml Blut und 1 g Gewebe unter Verwendung der Maxi -Säule |
Anwendungen | PCR, Südlicher Bolzen und Virenerkennung, usw |
Reinigungsmethode | Maxi Spin-Säule |
Reinigungstechnologie | Silica-Technologie |
Prozessmethode | Handbuch (Zentrifugation oder Vakuum) |
Beispielstyp | Gewebe, Zellen, Blut, Speichel, Tupfer, Blutflecken, Samen, und andere klinische Proben |
Probenmenge | 3-10ml |
Elutionsvolumen | ≥ 700 μl |
Zeit pro Lauf | ≤ 90 Minuten |
Flüssigkeitstransportvolumen pro Säule | 4ml |
Bindungsausbeute der Säule | 5mg |
Prinzip
- Zellausfall: Ihre Probe ist lysiert (aufgebrochen) und mit Enzymen verdaut, um DNA in Lösung zu füllen.
- Erfassen: Die Mischung wird durch eine Kieselsäule geleitet. DNA haftet an der Kieselsäuremembran, Während Proteine und andere Verunreinigungen dies nicht tun.
- Verunreinigungen wegspülen: Die Säule wird gewaschen, um verbleibende Proteine und andere unerwünschte Moleküle zu entfernen.
- DNA -Freisetzung: Reine DNA ist eluiert (abgewaschen) Die Silica -Membran mit einer speziellen Pufferlösung. Diese gereinigte DNA ist dann zur weiteren Analyse bereit.
Vorteile
- Hochwertige DNA – erfüllt eine Vielzahl nachgelagerter Anwendungen, inklusive PCR, qPCR, Enzymverdauung, Hybridisierung, usw.
- Schnell – ohne Trennung von Leukozyten, organische Extraktion, oder Ethanolfällung
- Einfach – Alle Nukleinsäuren können durch Direktverdau gewonnen werden
- Repinenz – speziell für die Isolierung von DNA aus 3-10 ml Blut und verwandte Körperflüssigkeiten ausgelegt
- Breite Anwendbarkeit – Umgang mit einer Vielzahl flüssiger Proben
- Wirtschaft – Ausgezeichnete Kostenwirksamkeitsleistung
Inhalt des Kits
Inhalt 10. | 10 Vorbereitungen | 50 Täter |
Reinigungszeiten | 10 | 50 |
Hipure GDNA Maxi -Säulen | 10 | 50 |
50ml-Sammelröhrchen | 20 | 100 |
Puffer-ATL | 120 ml | 550 ml |
Puffer AL | 120 ml | 2 X 300 ml |
Puffer GW1* | 53 ml | 220 ml |
Puffer GW2* | 25 ml | 110 ml |
RNase A | 40 mg | 180 ml |
Proteinase K | 120 mg | 540 mg |
Protease-Auflösungspuffer | 12 ml | 50 ml |
Puffer AE | 30 ml | 120 ml |
Lagerung und Stabilität
Speicherempfehlungen:
- Proteinase K und RNase a: Bei der Ankunft, Lagern Sie bei 2-8 ° C.. Kurzfristige Lagerung (bis zu 12 Wochen) bei Raumtemperatur (15-25°C) ist akzeptabel, ohne die Leistung zu beeinträchtigen.
- Verbleibende Kit -Komponenten: Kann bei Raumtemperatur gelagert werden (15-25°C) und bleiben zumindest stabil 18 Monate unter diesen Bedingungen.
Kaufratgeber
Name | KATZE NEIN | Probenmenge | Leukozytenprotokoll* | Columtyp | Elutionsvolumen | Durchschnittlicher Ausbeute | Zeit pro Lauf |
HiPure Blood DNA Mini-Kit | D3111 | 10-200μl | 1ml | 2ml-Säule | ≥20μl | 5-9Mg/200ml | ≤30 Minuten |
HiPure-Gewebe&Blut-DNA-Midi-Kit | D3113 | 0.2-2ml | 10ml | 1.5ml-Säule | ≥ 300 μl | 20-40μg/1m | ≤ 80 Minuten |
HiPure-Gewebe&Blut -DNA -Maxi -Kit | D3115 | 3 -10ml | 10ml | 15ml-Säule | ≥ 700 μl | 20-40μg/1m | ≤ 90 Minuten |
HiPure-Gewebe&Blut-DNA 96 Bausatz | D3117 | 1-200μl | 1ml | 96 Brunnenplatte | 3-8Mg/200ml |